高校化学工程学报

2019, (01) 117-127

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双柱连续流层析亲和分离抗体的过程设计与应用
Process design and application of twin-column continuous chromatography for antibody affinity separation

高宗晔;史策;姚善泾;林东强

摘要(Abstract):

针对单抗生产下游过程的瓶颈-蛋白A亲和分离,以提高产率和降低成本为目标,探讨了双柱连续流层析的新方法。从过程设计的关键因素出发,比较和分析了保留时间和蛋白浓度的影响,优化了分离条件,并应用于细胞培养液中单抗的分离。以两种蛋白A亲和介质MabSelect SuRe和UniMab为典型介质,考察了不同保留时间和IgG浓度下的穿透曲线,比较了保留时间和蛋白浓度对产率、介质利用率和缓冲液消耗的影响。结果表明,与常规的批次层析相比,双柱连续流层析拥有更优越的分离性能,低保留时间条件下的产率和介质利用率显著提高,缓冲液消耗减少,特别适合于高流速操作。对于从细胞培养液中分离单抗,双柱连续流层析的分离性能与常规批次层析相当,单抗纯度在97%以上、收率87%以上、聚集体含量低于2%、宿主细胞蛋白含量低于300 ppm,优势是产率提高,介质利用率从20%~30%提高到70%~80%,,缓冲液消耗下降为常规批次层析过程的1/5~1/4,显示出良好的应用前景。

关键词(KeyWords): 连续流层析;抗体;分离;产率;介质利用率

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国际科技合作专项项目(2015DFG42070);国家自然科学基金(21776243,21476198)。

作者(Author): 高宗晔;史策;姚善泾;林东强

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DOI: 110.3969/j.issn.1003-9015.2018.00.019

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